【摘要】

目的 分析体检人群小麦IgG 抗体水平，探讨体检人群小麦不耐受的发病率以及与性别间的关系，并进行不耐受组分分析。方法 乙醇-丙酮法提取小麦蛋白，用粗提蛋白包被微孔板，酶联免疫吸附法检测122例健康体检者小麦蛋白IgG 水平，SDS-PAGE 电泳分析其蛋白组分，并用酶免疫印迹方法分析提取液中与IgG 特异性结合的主要蛋白组分。结果 本地区体检人群小麦不耐受抗体阳性率为21.3%，其中女性（23.53%），男性（18.52%），P >0.05，差异无统计学意义；酶免疫印迹结果显示，小麦蛋白不耐受组分主要有4 种，主要为麦谷蛋白，且个体间所针对的抗原无明显差异。结论 体检人群中部分存在小麦蛋白IgG 抗体；且小麦蛋白不耐受性别无明显相关；不同个体间小麦主要不耐受组分无明显差异。

【关键词】 食物不耐受； 小麦蛋白； 特异性IgG； 体检人群

Detection of wheat -specific IgG and analysis of wheat albumen relevant intolerance component in health examination population

【Abstract】Objective To detect and analyze the wheat-specific IgG in health examination population, and to investigate the proportion of wheat intolerance and the relationship of wheat intolerance with gender, to explore the main tolerance component in wheat. Methods The wheat protein was extracted using ethanol and acetone extraction method, and the microplates were coated with the crude protein. The wheat-specific IgG were detected with enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) in 122 healthy persons and analyzed the proportion of wheat intolerance and the relationship of wheat intolerance with gender. The component of crude protein was analyzed by electrophoresis and the main intolerance ingredients were identified by Western -blotting. Results Data showed the positive rate in the cohort was21.3%, and positive rate in females (23.53%) , in males (18.52%) (P >0.05); the intolerance rate were no significant difference between the two groups (P>0.05). Western-blotting showed that there were four main intolerance components in the wheat, and different individuals showed no difference when response to these components. Conclusion The results indicated that the wheat-specific IgG antibodies exist commonly in health examination group; There is no correlation of wheat intolerance of gender, while there are no difference in the main intolerance components between individuals.

【Key words】 Food intolerance; Wheat ;Specific IgG antibodies; Health examination population

食物不耐受是机体免疫系统针对某种或多种食物产生的过度保护性的复杂变态免疫反应，并针对这些食物产生特异性IgG,引起全身组织（包括血管）发生炎症反应^[1]，表现为全身各系统的症状或疾病。据报道IgG介导的食物不耐受在人群中的发病率约45% ^[2-3]，因缺乏明确的诊断标准， 临床多采用对症治疗，但由于长期反复发作，缺乏正确的治疗而引发器质性病变^[4]。不耐受原是食物中能引发不耐受的关键蛋白，检测患者外周血中的特异性IgG进而推测不耐受原是诊断食物不耐受重要的体外试验方法。引发食物不耐受的成分中，蛋白种类很多，因此，鉴别不耐受食物的蛋白提取液中的不耐受组分和探索不耐受原的纯化方法具有重要理论价值和临床应用价值。

小麦及其制品是我国居民的主要食物，也是膳食蛋白的主要来源，已有研究称小麦不耐受发病率高达15%，有较高的病患率和漏诊率，且并发症状较多，严重影响了患者的生活，它已经是食品健康领域的一个重要挑战。因此，检测人群中小麦蛋白IgG 抗体水平及引起小麦不耐受的成分有较大的意义。本文以小麦蛋白提取液为抗原，通过酶联免疫吸附试验对122例天津市南开医院体检人群血清中特异性IgG进行分析，并选取特异性IgG含量较高的阳性血清，通过酶免疫印迹技术分析引起小麦不耐受的蛋白组分。

1.材料与方法

 材料

1.1.1 临床标本  随机选取2014年6月至2014年7月在天津市南开医院进行体检的122例血清标本，其中男性54例（44.26%），女68例（55.74%）。

1.1.2  重要仪器  96 孔酶标反应板（美国Costar 公司），Allegra 64R型低温高速冷冻离心机（Beckman 公司），EXL-800型酶标分析仪（Biotek 公司），垂直电泳槽及转印槽（BioRad 公司）。

1.1.3主要试剂  辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗人IgG抗体（SouthernBiotech），碱性磷酸酶（AP）标记的抗人IgG 抗体（Jackson），蛋白包被液（0.01M pH 7.2 PB），样本稀释液（0.01M pH 7.4 PBS），胎牛血清（Gibco）。