幽门螺杆菌是一种螺旋形，微厌氧，对生长环境要求十分刻薄的细菌。主要寄居于胃窦部。幽门螺杆菌（HP）作为胃癌致病的生物性因子业已得到流行病学、实验室研究和临床观察所证实^[1]。幽门螺杆菌感染与食管鳞癌的关系亦十分密切^[2]。但进展期癌治疗效果差、花费大且5年生存率低，早诊早治是癌症预防与控制的重要策略之一^[3]。所以，研究食管癌前病变与幽门螺杆菌的感染尤为重要。本实验通过研究食管癌前病变、早期癌、中晚期癌患者幽门螺杆菌感染的情况，旨在了解食管癌癌变过程与幽门螺杆菌感染的关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象及标本来源

所以实验对象均来自于2010年1月至2011年6月就诊于河北医科大学第四医院内镜患者，所有患者均来自于河北省境内太行山南麓食管癌高发地区。所取标本中食管正常粘膜组织(Esophageal normal tissue, ENT)26例，食管鳞状上皮轻/中度非典型增生粘膜组织(Esophageal mild or moderate dysplasia tissue, EDYSⅠ~Ⅱ) 26例，食管鳞状上皮重度非典型增生/原位癌组织（Esophageal severe dysplasia/carcinoma in situ tissue, EDYSⅢ/CIS) 36例，食管鳞状细胞癌组织(Esophageal squamous cell cancer, ESCC)28例。所有患者在术前均无放化疗史，均未服用过抑酸剂及抗菌药物。采集标本前已取得患者及其家属知情同意，每一实验对象均由同一主治及以上内镜医师取材。所有患者于病灶处及胃窦处各取标本2块（每块重约为30g），其中1块采用活组织快速尿素酶试验（RuT）检测H.pylori感染情况，另1块甲醛固定迅速送病理检验，并用Warthin- Starry 银染色法寻找幽门螺杆菌。所有病变组织均有明确的病理诊断，胃窦组织病理均为粘膜慢性炎症。

1.2 方法

快速尿素酶试验（RuT）检测：捏住试纸右端边缘，揭开不干胶至虚线处，胃镜下钳取组织，放入圆形黄色试纸中央，然后将不干胶试纸复合在胶片上，使不干胶与胶片紧密结合，1-3分钟内观察颜色变化；组织边缘的试纸1-3分钟内由黄色变成紫红色为阳性，不变色为阴性。

Warthin- Starry 银染色检测：①组织固定于10%福尔马林，常规脱水包埋。②切片厚4-6μm，常规脱蜡至水。③蒸馏水浸洗切片1min，再重复2次。④切片入酸性硝酸银溶液，水浴燃染色。⑤在上诉染色过程中配制Warthin-Starry染色液。取出切片入Warthin-Starry染色液，置于56度水浴染色制切片呈淡黄棕色时取出，平放在染色加上，用预热的自来水彻底清洗。⑥自来水冲洗。⑦常规脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。⑧显微镜下观察。